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补肾益气和血方改善胚泡着床障碍小鼠子宫内膜容受性的研究

来源:www.huaxia120.com

摘 要 目的:研究补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠着床期子宫内膜容受性的影响。方法:    此处内容(治疗方法/用药处方/诊疗技术/经验),已屏蔽,需要了解,请联系服务中心,以便我们为您服务。结论:补肾益气和血方通过促进子宫内膜发育,调节胚泡着床障碍小鼠子宫组织PR因的表达,改善子宫内膜容受性,利于胚泡着床。

关键词 补肾益气和血方子宫内膜容受性孕激素受体 

不孕症的发生率约占育龄妇女的15%,尽管人工助孕技术(IVF-ET)治疗不孕症已获得较大的成功,但其妊娠率仍较低。胚泡着床障碍是导致IVF-ET临床妊娠率低的主要原因之一,子宫内膜容受性差又是胚泡着床障碍的主要原因之一[1]。因此,改善子宫内膜容受性,提高着床率是提高人工助孕技术孕育成功率的关键。

临床研究证实补肾益气和血方配合IVF-ET治疗不孕症,可提高胚泡移植的成功率[2],并观察到该方能提高胚泡着床障碍小鼠的胚泡着床率[3]。为进一步探讨其作用机制,本实验拟通过观察对胚泡着床障碍小鼠胚泡着床期子宫内膜形态结构、孕激素受体(progesterone receptorPR)表达的变化,进一步阐述补肾益气和血方对着床期子宫内膜容受性的影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物      此处内容(治疗方法/用药处方/诊疗技术/经验),已屏蔽,需要了解,请联系服务中心,以便我们为您服务。

1.2 实验药物及试剂    此处内容(治疗方法/用药处方/诊疗技术/经验),已屏蔽,需要了解,请联系服务中心,以便我们为您服务。

1.3 动物分组及处理      此处内容(治疗方法/用药处方/诊疗技术/经验),已屏蔽,需要了解,请联系服务中心,以便我们为您服务。

1.4 光镜观察      此处内容(治疗方法/用药处方/诊疗技术/经验),已屏蔽,需要了解,请联系服务中心,以便我们为您服务。

1.5 RT-PCR     此处内容(治疗方法/用药处方/诊疗技术/经验),已屏蔽,需要了解,请联系服务中心,以便我们为您服务。

1.6统计方法  实验数据用`c±s表示,经SPSS 11.0软件处理,组间比较采用F检验和q检验。

2 结果

2.1补肾益气和血方对小鼠胚泡着床的影响  由表1可见,与对照组相比,模型组着床率和平均着床胚泡数降低。而中药组着床率和平均着床胚泡数较模型组显著增高,与对照组务明显差异。

1补肾益气和血方对小鼠胚泡着床的影响(`c±s

 

孕鼠数/受试

动物数

平均着床胚泡数

`c±s

着床率

%

18/20

9.94±2.48

90

5/20

1.40±0.55

25

13/20

8.31±2.18

65

与对照组相比, P0.05 .

2.2补肾益气和血方对子宫内膜组织形态结构的影响  与对照组相比,模型组宫腔上皮厚度变薄,基质和腺体发育不同步,腺体以增殖期改变为主,腺体小而直,数目少,呈单层立方上皮,可见核下空泡,但大部分腺上皮分泌活动不明显;间质以分泌期样改变为主,疏松、水肿,部分间质致密。腺体和间质的改变提示着床前两者的发育不同步。中药组子宫内膜发育较模型组有明显改善,接近或达到正常组子宫内膜的发育水平,表现为子宫内膜蜕膜化,或腺体与间质发育同步:腺腔扩张,分泌物多,可见核下空泡,间质蜕膜样变,间质细胞核分裂相多见。表2、表3显示模型组内膜腺上皮、腺体、腺腔面积与周长均减少,子宫内膜变薄,提示模型组子宫内膜发育不良。而中药组内膜腺上皮、腺体、腺腔面积与周长均较模型组有明显增强,提示中药组子宫内膜发育较模型组改善。

2补肾益气和血方对子宫内膜厚度的影响(`c±s. 

孕鼠数/受试

动物数

子宫内膜平均厚度 (μm)

肌层长度(μm)

内膜/肌层比值

对照组

4/4

208.09±31.85

130.39±18.96

1.64±0.40

模型组

1/4

152.19±16.16

137.09±11.50

1.11±0.09

中药组

3/4

190.03±24.13

131.97±19.60

1.48±0.38

与对照组相比, P0.05 .

3  补肾益气和血方对子宫内膜组织形态结构的影响(`c±sn=4.

 

组别 腺体 腺腔 腺上皮细胞

面积

)

等效直径

(μm)

面积

)

等效直径

(μm)

面积

)

等效直径

(μm)

对照组 241.41±21.88 18.99±2.26 39.31±10.84 8.01±2.28 202.10±18.35 5.49±1.18
模型组 198.16±26.92 14.67±2.34 18.50±5.06 6.09±1.94 179.66±28.09 4.29±1.03
229.62±19.32 17.43±2.13 33.44±9.40 7.39±2.17 196.18±18.54 5.02±1.47

与对照组相比, P0.05 .

2.4  补肾益气和血方对子宫PR mRNA表达的影响  2%琼脂糖凝胶电泳分析,PRmRNAβ-actin mRNA的扩增产物和理论长度一致。中药组子宫PRmRNA表达较模型组显著增高P0.05,与对照组无显著性的差异(P0.05),而模型组子宫PRmRNA的表达较正常组和中药组的表达均显著降低P0.05其分析结果见表8

小鼠子宫组织PR mRNA的表达(`c±s

孕鼠数/受试动物数

PR/β-actin

对照组

5/6

1.205±0.029

模型组

1/6

0.806±0.010

中药组

4/6

1.119±0.091

与对照组相比, P0.05 .

讨 论

胚泡着床是子宫内膜与胚泡相互作用的过程,子宫内膜    此处内容(治疗方法/用药处方/诊疗技术/经验),已屏蔽,需要了解,请联系服务中心,以便我们为您服务。

孕激素受体(PR)是一种核受体,多分布于子宫内膜和肌层中,    此处内容(治疗方法/用药处方/诊疗技术/经验),已屏蔽,需要了解,请联系服务中心,以便我们为您服务。子宫内膜容受性下降,胚泡不能着床。

中医理论认为不孕症乃    此处内容(治疗方法/用药处方/诊疗技术/经验),已屏蔽,需要了解,请联系服务中心,以便我们为您服务。使传统理论与现代医学相得益彰,为中药与人工助孕技术相结合而提高不孕症的孕育成功率提供了实验依据。

参考文献:

1张明扬李国光,蔡鸿德,等.不孕症及生殖内分泌学〔M.第二版,北京:北京大学医学出版社,2005.123.

2张明敏黄光英,陆付耳,等. 补肾益气活血汤对多次助孕技术失败患者结局的影响[J]. 微循环学杂志, 2002122):10-13.

3刘艳娟,黄光英,陆付耳,等. 健胎液对胚泡着床障碍小鼠胚泡着床作用的研究[J].上海中医药杂志,200438(4):46-48.

4〕史小林.人类生殖学〔M. 北京:科学出版社, 200262.

5〕李美芝.妇科内分泌学.北京:人民军医出版社,2001307-308.

6Conneely OM, Mulac-Jericevic B, Lydon JP, et al. Reproductive functions of the progesterone receptor isoforms: lessons from knock-out mice [J]. Molecular and Cellular Endocrinology2001179(1-2)97-103.

7霍立军,杨增明.孕酮调节的胚胎着床相关分子及其作用 [J].中华妇产科杂志,2002378):505507.

8Tranguch S, Daikoku T, Guo Y, et al. Molecular complexity in establishing uterine receptivity and implantation [J]. Cell Mol Life Sci2005 ,62(17):1964-73.

9Lim H, Ma L, Ma WG, et al. Hoxa-10 regulates uterine stromal cell responsiveness to progesterone during implantation and decidualization in the mouse [J]. Mol Endocrinol1999;13(6):1005-17.

10戴林,沈浣,虞有智,等.不孕患者子宫内膜孕激素受体研究 [J].中华病理学杂志,2000, 29 (3):184-186.

11苗明三.法定中药药理与临床[M]. 北京:世界图书出版社,1998251-420.

12〕雷载权张廷模.中华临床中药学[M].北京:人民卫生出版社, 1998786-1749.

13沈映君.中药药理学[M].北京:人民卫生出版社,2000922.

14黄光英,韩庆红,徐珉,等.健胎液对IUGR孕鼠红细胞膜Na+,K+ATPase, Ca2+,Mg2+ATPase作用的研究 [J].中国中西医结合杂志,1998,18 (特集):346-348.

 

(稿件编号:huaxia120_70500)(撰稿专家:黄光英  刘艳娟(编辑:刘凤国   

撰稿专家简介黄光英,教授,博士生导师中国中西医结合学会常务理事、中华医学会常务理事、中国中西医结合学会妇科专业委员会副主任委员。

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